Bước 1: Chọn lọc cây mẹ và giám định một số bệnh nguy hiểm
Chọn lọc cây mẹ đầu dòng ưu tú bao gồm chọn các đặc tính tốt của cây như sinh trưởng khoẻ mạnh, năng suất cao, chất lượng quả ngon và phải đúng giống.
Cây sau đó được giám định kiểm tra các loại bệnh do virus như: BBTV, CMV, BSV... bằng các kỹ thuật PCR và ELISA.
Các cây được chọn lọc phải hoàn toàn sạch các bệnh nêu trên, sau đó trồng trong nhà lưới để thu chồi nhân giống.
Bước 2: Tạo chồi ban đầu và nhân chồi invitro
Cây chuối có chiều cao từ 0,5 - 1,0 m lấy từ cây mẹ đầu dòng (bước 1), tách bỏ những lớp thân giả và phần rễ củ bên ngoài, khử trùng bằng dung dịch cồn 70%.
Mẫu cấy có kích thước 1,5 x 1,5 x 1,0 cm được đưa vào môi trường tái sinh chồi (MS + 4mg/1 BA + 0,5mg/1 IAA + 30g/l sucrose + 0,9% agar Hạ Long).
Sau 4 - 5 tuần, khoảng 10 - 12 chồi/mẫu cấy sẽ được tái sinh. Tách mẫu cấy đã tái sinh ra từng cụm nhỏ mang 34 chồi, cấy sang môi trường nhân nhanh cụm chồi (MS + 5mg/1 BA + 0,1mg/1 IAA + Ademin 80mg/1+ 30g/l sucrose + 0,9% agar Hạ Long), cấy chuyền sau 4 - 5 tuần/lần. Số lần cấy chuyền không vượt quá 6 lần.
Bước 3: Tái sinh cây hoàn chỉnh
Môi trường tái sinh (MS BAP 2mg/l + 20g/1 sucrose + than hoạt tính 0,1 - 0,15%) sẽ được bổ sung vào bình nuôi cấy nhằm giúp chồi vươn dài và ra rễ sau 3 - 4 tuần nuôi cấy.
Bước 4: Ra ngôi cây trong nhà lưới
Cây tái sinh trong bình cấy sẽ được chuyển ra nhà lưới giữ trong điều kiện mát sau 2 - 3 tuần trước khi ra ngôi.
Cây ra ngôi cao trên 5 cm sẽ được trồng trực tiếp trong bầu đất phân gà + bao trái, xơ dừa + cát (1:1:1), còn những cây nhỏ hơn sẽ được chăm sóc tập trung trong khay nhựa khoảng 2 - 3 tuần rồi mới chuyển ra bầu đất.
Cây con trước khi trồng phải đạt tiêu chuẩn cao từ 20 - 30 cm và mang 6 - 7 lá.
Vườn cây chuối nuôi cấy mô.